提供商:         上海研謹生物
服務名稱:       同位素標記定量
服務：            4-6周
規(guī)格:           實驗服務
價格：          500元
同位素標記定量:
iTRAQ (isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation) &TMT (Tandem Mass Tags)分別由AB Sciex公司和Thermo公司研發(fā)的多肽體外標記定量技術，利用多種同位素試劑標記蛋白多肽N末端或者賴氨酸側鏈基團，不同分子量的試劑對不同來源的樣品進行標記從而實現(xiàn)不同樣品間蛋白質組的比較。
iTRAQ實驗步驟:
1.樣品準備:將待測樣品進行定量計算出樣品蛋白濃度;
2.蛋白還原烷基化及酶解:每組樣品各取100μg按照iTRAQ試劑盒要求進行處理，使用測序級胰蛋白酶溶液酶解后,超濾管離心收集酶解肽段;
3. iTRAQ標記:將ITRAQ試劑平衡到室溫,用150μL異丙醇溶解，取酶解肽段加入iTRAQ試劑后室溫反應2 h,加入水終止反應，等量混合不同組樣品，真空冷凍干燥樣品: .
4. LC-MS-MS分析:使用Thermo的Q-Exactive Orbitrap進行串聯(lián)質譜鑒定。
5.數(shù)據(jù)處理及生信分析
 
 
結果展示：
 
全局分析聚類熱圖
 
TOP10的蛋白數(shù)目統(tǒng)計分析
實驗周期及交付標準
1.實驗周期: 4-6周
2.交付標準:蛋白定量結果、鑒定結果、質譜原始數(shù)據(jù)、生信分析結果(G0分析. KEGG分析等等)
需確認的信息
1.樣本的種屬
2.樣本的類型(組織or細胞or血液)
3.樣本的數(shù)量及分組
4.分析要求
參考文獻
[1]XuX，Zhu Q，Zhang R，et al. ITRAQ-Based Proteomics Analysis of Acute Lung Injury Induced by Oleic Acid in
Mice[J]. Cellular Physiology and Biochemistry, 2017:1949-1964.
[2]QuZ, GaoF , LiL, et al. Label-Free Quatitative Proteomic Analysis of Diferentially Expressed Membrane Proteins
of Pulmonary Alveolar Macrophages Infected with Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome
Virus and Its Attenuated Strain[J]. PROTEOMICS, 2017:1700101.
 
從2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫(yī)學實驗外包及論文潤色服務，協(xié)助客戶各類實驗服務及論文潤色，是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯(lián)系。
實驗代做：

Elisa免費代做	Wb代做	蛋白芯片定制	石蠟冰凍切片
HE染色	透射電鏡	掃描電鏡服務	免疫共沉淀
流式細胞分選	CCK8檢測代做	組織芯片微陣列	免疫細胞化學ICC
熒光染料標記	油紅O染色	免疫熒光染色	免疫共沉淀（Co-IP）實驗
熒光定量PCR	探針合成	酪蛋白酶譜MMP	免疫組化IHC
激光共聚焦	蛋白雙向	蛋白相互作用	課題協(xié)助外包
CBA流式多因子	瓊脂糖凝膠電泳	疾病模型	藥理毒理